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高效液相色譜法的優點和常見問題?



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??? 高效液相色譜法的主要優點是:

??? (1)分辨率高于其他色譜方法 
??? (2)速度快,十分鐘至十分鐘即可完成;

??? (3)高可重復性; 
??? (4) HPLC柱可重復使用;

??? (5)全自動操作,分析精度高。 
??? 根據分離過程中溶質分子與固定相相互作用的不同,高效液相色譜可分為液液色譜、離子交換色譜、液固色譜、和體積排除色譜四種基本類型。

??? 高效液相色譜法廣泛應用于生物領域,用于以下產品的分離和鑒定: 
??? (1)氨基酸及其衍生物;(2)有機酸;(3)抗生素;(4)生物堿;(5)核酸及其降解產物;(6)糖;(7)卟啉;(8)類固醇;9 .蛋白質、酶和多肽;(10)脂質等。

??? 高效液相色譜法常見的問題有: 
??? 1.
渦流擴散 
??? 當流動相與較大的固體顆粒碰撞時,就會產生渦流,就像流水與石頭碰撞一樣。如果柱內填充不均勻,部分部位疏松或有細槽,流動相速度快;如果某些部位結塊或安裝緊密,流動就會變慢,多條流動路徑會快慢不一,會使區域變寬。 

??? 2. 分子擴散 
??? 分子擴散是指物質分子從高濃度區域向低濃度區域的運動,又稱縱向分子擴散。為了減少分子的擴散,應該使用小而均勻的固體顆粒進行柱載。

??? 3.傳質 
??? 分離出的物質應在流動相和固定相中平衡,形成窄帶。在液相色譜法中,溶質分子在兩液相之間分布或在固相上吸附和解析需要一定的時間。

??? 4. 流動相流量 

??? 當流速過低時,分子擴散嚴重,特別是在氣相色譜中。如果將理論塔板的高度與流速繪制成曲線,則理論塔板的高度隨著流速的增加而迅速減小。當達到最小值時,流速再次增大,理論塔板高度再次增大,傳質起主要作用。 
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以上就是有關于高效液相色譜法的主要優點和常見問題介紹,如果您還想了解關于儀器資訊,歡迎咨詢客服人員了解。

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